【高效液相色谱中常用的溶剂】在高效液相色谱(HPLC)分析中,溶剂的选择对分离效果、检测灵敏度和系统稳定性具有重要影响。不同类型的溶剂适用于不同的样品和色谱柱,合理选择溶剂可以提高分析效率并延长仪器寿命。以下是对常用溶剂的总结与分类。
一、常见溶剂分类及特点
溶剂名称 | 极性 | 沸点(℃) | 适用范围 | 特点 |
乙腈(ACN) | 高极性 | 81.6 | 疏水性化合物、蛋白质等 | 挥发性低,适合梯度洗脱,与大多数检测器兼容 |
甲醇(MeOH) | 中等极性 | 64.7 | 多数有机物、药物分析 | 价格较低,易得,但粘度较高 |
乙醇(EtOH) | 中等极性 | 78.4 | 生物样品、代谢物 | 与水混溶性好,但挥发性较差 |
异丙醇(IPA) | 中等极性 | 82.5 | 脂肪酸、脂类 | 用于改善某些疏水性物质的保留 |
四氢呋喃(THF) | 中等极性 | 66.0 | 极性或非极性混合物 | 溶解性强,但易氧化,需避光保存 |
丙酮(ACE) | 中等极性 | 56.5 | 小分子化合物 | 溶解力强,但易挥发,需注意安全 |
水(H₂O) | 极性 | 100 | 极性化合物、离子型物质 | 基础流动相,常与有机溶剂混合使用 |
二氯甲烷(DCM) | 非极性 | 39.8 | 非极性或弱极性化合物 | 溶解能力强,但毒性较高 |
正己烷(n-Hexane) | 非极性 | 68.7 | 非极性物质、脂肪类 | 常用于反相色谱中的非极性成分 |
乙醚(Et2O) | 非极性 | 34.6 | 易挥发物质、脂溶性化合物 | 溶解力强,但易燃,需谨慎使用 |
二、溶剂选择建议
在实际应用中,应根据样品性质、色谱柱类型和检测方法选择合适的溶剂组合:
- 反相色谱:常用甲醇、乙腈作为有机溶剂,配合水或缓冲液使用。
- 正相色谱:多采用正己烷、乙醚等非极性溶剂。
- 离子色谱:以水为基质,加入少量有机溶剂调节保留时间。
- 梯度洗脱:通常采用乙腈/水或甲醇/水体系,以优化分离效果。
此外,还需注意溶剂的纯度、毒性及对检测器的影响。例如,乙腈对紫外检测器无干扰,而某些含卤素溶剂可能对质谱检测产生背景信号。
三、注意事项
- 溶剂需经过过滤和脱气处理,以避免堵塞色谱柱。
- 避免使用高浓度酸或碱溶液,以免腐蚀泵和色谱柱。
- 使用挥发性溶剂时,应注意通风和防火措施。
通过合理选择和使用溶剂,可以有效提升HPLC分析的准确性与重复性,确保实验数据的可靠性。